液氮罐在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的使用

　　細(xì)胞培養(yǎng)的一般過程主要包括四個步驟:準(zhǔn)備、材料提取、培養(yǎng)和冷凍復(fù)蘇。為了保存細(xì)胞，尤其是不易獲得的突變細(xì)胞或細(xì)胞株，應(yīng)冷凍細(xì)胞。冷凍溫度一般采用196℃液氮溫度，將細(xì)胞收集到冷凍管中，加入含有保護(hù)劑(一般為二甲基亞或甘油)的培養(yǎng)基，冷卻速度一定，后儲存在液氮罐中。在低的溫度下，細(xì)胞的保存時間幾乎是無限的。

　　胚胎冷凍保存技術(shù)

　　胚胎冷凍保存技術(shù)是指利用低溫保護(hù)劑在低溫條件下保存胚胎的技術(shù)。這項技術(shù)是由于人工授精技術(shù)在20世紀(jì)下半葉的廣泛應(yīng)用而產(chǎn)生的。動物胚胎的冷凍保存原理是由于低溫降低了胚胎內(nèi)的變質(zhì)反應(yīng)速度。溫度越低，胚胎保存時間越長。

　　目前研究了慢速冷凍、快速冷凍、一步冷凍、直接移植冷凍、玻璃化冷凍等多種胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍法的步驟如下:

　?、僭谑覝叵聦⑴咛シ湃?5%的玻璃溶液(VS液)中進(jìn)行預(yù)處理15分鐘。

　　②在高濃度(75%190%)的VS液中保存預(yù)處理后的胚胎20-40分鐘。金鳳液氮罐

　　③將經(jīng)過兩步抗凍處理的胚胎直接放入液氮中保存。金鳳液氮罐

　　另外，菌種、疫苗、骨組織、精子等物質(zhì)也可以用液氮罐保存，都能達(dá)到良好的長期儲存效果。